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在疏水作用色譜也就是反相色譜中經(jīng)常能聽到的名詞，在實驗過程中的表現(xiàn)形式為，對物質(zhì)沒有保留，出峰時間靠前，使得峰之間沒有保留。
案例
色譜柱：Ultimate® XB-C8 21.2×250mm，10μm。
流動相：近似純水。
第一天
正常活化進樣色譜圖：
晚上不進樣，由于流動相中沒有酸堿等添加劑，清洗自動進樣器后關(guān)機。
第二天
直接流動相沖洗2倍柱體積進樣色譜圖：
（中間已經(jīng)進樣過30多針）
一切正常，由于實現(xiàn)了色譜柱自由，樣品也足夠干凈，為了下周一過來能更快做實驗，仍然清洗自動進樣器后關(guān)機。
周一
平衡2倍柱體積進樣：
出峰異常沒有峰，懷疑色譜柱沒有平衡好，畢竟過了周末，沖多洗一段時間，出峰正常，但是出峰提前了2分鐘幾個雜質(zhì)峰均為分離。
排查原因：
1、流動相是否弄錯了；
2、儀器參數(shù)設(shè)置是否正常；
3、儀器實際流速是否正常。
均正常后，懷疑色譜柱相塌陷，雖然C8的極性較強，耐受高比例的水甚至純水，但是畢竟在近純水的環(huán)境中浸泡了48小時，80%乙腈水沖洗5倍柱體積，再進樣正常。
知識點：反相色譜固定相。
例如：C18，C8，PHEYNL等耐受高比例的水甚至是純水，其實是指在這樣的流動相體系中不發(fā)生相塌陷，保留時間峰面積等都穩(wěn)定，不影響日常檢測。
在這個案例中，C8鍵合相在長時間浸泡在近純水的體系中仍然出現(xiàn)了相塌陷，因此，在較長時間不使用時還是需要用較高比例的有機溶劑水進行沖洗保持。
上一篇：影響凝膠色譜分離的因素
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